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茶皂素對(duì)蝦池中幾種有害魚類的毒性Ⅱ.茶皂素對(duì)蝦池中幾種有害魚類的毒性 朱全芬1 夏春華1 朱伯榮1 梁亞全2 孫修濤2 唐麗萍1 (1中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所,杭州) (2中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所,青島) 摘 要 通過(guò)對(duì)蝦池中6種魚類試驗(yàn)結(jié)果表明,茶皂素類對(duì)魚類具有很強(qiáng)的毒性作用,其中茶皂素Ⅰ對(duì)鱸魚、紋縞鰕虎魚、鈍尖尾鰕虎魚、梭魚、三刺魨及頜針魚的全致死濃度為0.5—0.7ppm；茶皂素Ⅱ?qū)|魚和紋縞鰕虎魚全致死濃度在1ppm左右。兩種型號(hào)茶皂素對(duì)魚類、對(duì)蝦及沙蠶的毒性差異很大，且能在海水中自行降解至無(wú)毒，可作為對(duì)蝦養(yǎng)殖前清池或養(yǎng)殖中清除有害魚類的一種理想、安全的藥劑。 關(guān)鍵詞：茶皂素，魚毒活性，蝦池，魚類，清池劑 前 言 捕食對(duì)蝦的魚類多達(dá)17種。據(jù)解剖觀察，1尾體長(zhǎng)10.7厘米的鱸魚胃中有2厘米的對(duì)蝦25尾；1尾15.5厘米的四指馬鲅胃中有體長(zhǎng)4—4.5厘米對(duì)蝦5尾；9尾小鱸魚在水體2米的池內(nèi)，不到50分鐘將45尾體長(zhǎng)2.0—2.5厘米的對(duì)蝦幼仔一食而空；29尾平均體長(zhǎng)12.5厘米的黑鯛胃中發(fā)現(xiàn)對(duì)蝦22尾。可見(jiàn)在對(duì)蝦養(yǎng)殖魚類危害之嚴(yán)重。 茂野曾以紋縞鰕虎魚、鳚魚和對(duì)蝦為材料，驗(yàn)證魚藤根的魚毒效果，含有4—5%的魚藤酮的魚藤粉，對(duì)這二種魚的致死濃度為0.5—1ppm，對(duì)蝦可耐至5ppm。茶皂素的魚毒作用如何？本研究以鱸魚、鈍尖尾鰕虎魚、紋縞鰕虎魚和梭魚為主要對(duì)象，對(duì)6種魚類進(jìn)行了兩種型號(hào)茶皂素的毒性比較試驗(yàn)。 材料和方法 （一） 材料 1. 茶皂素同Ⅰ報(bào) 2. 供試魚類 紋縞鰕虎魚（Tridentiger trigonocephalus GLL）體長(zhǎng)1.6—7.9 厘米，平均3.2厘米；鱸魚（Lateolabrax japonicus Cuvier & Yalencien）體長(zhǎng)8.8—10.6厘米，平均9.58厘米；鈍尖尾鰕虎魚（Chaeturichthys hexanema Bleeker）體長(zhǎng)9.7—18.8厘米，平均14.04厘米；梭魚（Mugil so-iny Basilewsky）體長(zhǎng)9.4—19.4厘米，平均11.06厘米；三刺魨（Tricenthus brevirostris Temminck & Schlegel）；頜針魚（Tylosurus anastomlla Cuvier & Valenciennes）。 （二） 方法 試驗(yàn)在青島市黃海水產(chǎn)研究所太平角養(yǎng)殖室與昌邑縣下?tīng)I(yíng)鎮(zhèn)濰坊市海水養(yǎng)殖場(chǎng)兩地進(jìn)行。 紋縞鰕虎魚采用直徑48厘米、高50厘米的環(huán)氧樹酯桶飼養(yǎng)，總?cè)芤?0升；鱸魚及梭魚等其他幾種采用80×40×50厘米的全玻璃水簇箱放養(yǎng)，總?cè)芤?20毫升；每個(gè)處理組放養(yǎng)10尾；水源與Ⅰ報(bào)所載相同。 對(duì)于處理設(shè)置，為比較兩種型號(hào)茶皂素的魚毒活性強(qiáng)弱、半致死與全致死濃度以及致死速度與濃度的關(guān)系，對(duì)紋縞鰕虎魚進(jìn)行較寬濃度范圍試驗(yàn)，其中茶皂素Ⅰ設(shè)0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.45、0.5、1、2、3、4ppm等11個(gè)處理組；茶皂素Ⅱ設(shè)0、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、1、2、3、4ppm等12個(gè)處理組。其他魚種以茶皂素Ⅰ為主進(jìn)行試驗(yàn)，濃度設(shè)置至全致死為止，最高濃度在0.5—0.7ppm，其中鱸魚設(shè)0、0.3、0.35、0.4、0.41、0.42、0.43、0.44、0.45、0.5ppm等9個(gè)處理；鈍尖尾鰕虎魚設(shè)0.35、0.40、0.45、0.50、0.60、0.70ppm等6個(gè)處理；梭魚設(shè)0、0.3、0.35、0.4、0.5、0.6、0.7等7個(gè)處理。三刺魨和頜針魚與梭魚一起試驗(yàn)。 觀察項(xiàng)目除死亡數(shù)及死亡速度以外，輔以溶氧量測(cè)定。觀察持續(xù)時(shí)間因要求不同分48和96小時(shí)。 結(jié) 果 茶皂素的魚毒活性共進(jìn)行了13批試驗(yàn)，其主要結(jié)果歸納如下： 1. 紋縞鰕虎魚:又稱小鰕虎魚或花頭魚，在分類上屬鰕虎魚科（Gobiidae），棲潮間帶，個(gè)體較小，體長(zhǎng)在10厘米以下，主要危害蝦仔，是蝦池中的有害魚類。 不同濃度的茶皂素對(duì)紋縞鰕虎魚毒性試驗(yàn)結(jié)果表明（表1），兩種型號(hào)茶皂素對(duì)它均有毒性，其中茶皂素Ⅰ的全致死濃度在0.5ppm左右，茶皂素Ⅱ則需要1ppm，對(duì)應(yīng)的半致死量（LD50），前者為0.3—0.4ppm，后者在0.6—0.7ppm，所以茶皂素Ⅰ的魚毒活性強(qiáng)于茶皂素Ⅱ。此外，從試驗(yàn)結(jié)果還可以看出，紋縞鰕虎魚中毒對(duì)茶皂素的濃度非常敏感，以茶皂素Ⅰ為例，從沒(méi)有死亡到大量死亡的濃度區(qū)間在0.3—0.4ppm，僅0.1ppm之差，且死亡速度隨濃度提高而加快。 表1 兩種茶皂素對(duì)紋縞鰕虎魚的毒性試驗(yàn) Table 1 Toxicities of two forms of tea saponin to Tridentigic trigonocephalus GLL
*96小時(shí)內(nèi)死亡數(shù) *Mortality within 96 hours 全部致死的幾個(gè)處理的溶氧量測(cè)定表明，其死亡實(shí)屬中毒，并非缺氧所致。魚大量死亡時(shí)的溶氧量保持在5.3—5.4毫升/升相差無(wú)幾。 魚體解剖觀察發(fā)現(xiàn)，中毒死亡的魚鰓呈灰白色，鰓絲界線不分明，并發(fā)粘，明顯不同于自然死亡的魚鰓。至于茶皂素引起魚類中毒死亡的原因尚須進(jìn)一步研究。 2.鱸魚：在分類學(xué)上屬鮨科（Serranidae），在淺海分布很廣，生性活潑，游動(dòng)速度快，活動(dòng)在水域的中上層，捕食對(duì)蝦量大，是蝦池中危害嚴(yán)重的一種魚類。試驗(yàn)結(jié)果表明（表2），鱸魚對(duì)茶皂素Ⅰ很敏感，其全部致死為0.5ppm；半致死濃度與全致死濃度很接近，從引起中毒反應(yīng)到全部死亡的藥物濃度區(qū)間很；毒性反應(yīng)速度快，致死反應(yīng)在16小時(shí)內(nèi)見(jiàn)效（0.5ppm這個(gè)處理6小時(shí)時(shí)死亡率已達(dá)90%），超過(guò)16小時(shí)以后基本不再有死亡發(fā)生。 表2 茶皂素Ⅰ對(duì)鱸魚的毒性試驗(yàn) Table 2 Toxicity of tea saponinⅠto Lateolabrax japonicus Cuvier & Yalencien (單位：死亡率% unit ：death rate %)
茶皂素Ⅱ?qū)|魚毒性試驗(yàn)結(jié)果，其毒性確實(shí)低于茶皂素Ⅰ，濃度在0.6—0.9ppm范圍內(nèi)，48小時(shí)中死亡率為90%，所以它的全致死濃度大于1ppm。 3. 鈍尖尾鰕虎魚：又稱大鰕虎魚、狗 ，也屬鰕虎魚科（Gobiidae）。其特點(diǎn)，成魚個(gè)體較大，棲于池底筑穴生活，雖然游動(dòng)性小，但專食蛻皮時(shí)臥于池底的蝦體，故也是蝦池中一大有害魚類。試驗(yàn)結(jié)果表明（表3），茶皂素Ⅰ對(duì)它的全致死濃度略高于鱸魚，在0.6—0.7ppm左右。而且中毒引起的死亡反應(yīng)沒(méi)有鱸魚快，除0.7ppm這一處理組以外，其他各組超過(guò)16小時(shí)后還繼續(xù)有死亡發(fā)生，這可能與其活動(dòng)遲緩，呼吸量小，相應(yīng)的藥物吸入慢有關(guān)。 表3 茶皂素Ⅰ對(duì)鈍尖尾鰕虎魚的毒性試驗(yàn) Table 3 Toxicity of tea saponinⅠto Chaeturchthys hexanema Bleeker
4.梭魚：在分類學(xué)上屬鯔科（Mugilidae），生活于水域的中上層。這類魚不食對(duì)蝦，因此并不構(gòu)成危害，在池中以食對(duì)蝦的殘留的餌料為生，也是蝦池的一種魚類。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)梭魚比較難飼養(yǎng)，捕撈時(shí)易受傷，對(duì)照的死亡率也較高，但多次重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果仍然可以看出，茶皂素對(duì)梭魚同樣具有毒性作用，死亡率隨著濃度而遞增，全致死濃度0.7ppm左右，且毒性反應(yīng)也快，16小時(shí)可見(jiàn)效（表4）。 此外，在梭魚試驗(yàn)中。同時(shí)對(duì)三刺魨和頜針魚（屬水域上層魚類）進(jìn)行觀察，0.5ppm的茶皂素Ⅰ均能使這兩種魚致死，死亡速度快于梭魚。 表4 茶皂素Ⅰ對(duì)梭魚的毒性試驗(yàn) Table 4 Toxicity of tea saponinⅠto Mugil so-iny Basilewsk (單位：死亡率% unit ：death rate %)
討 論 通過(guò)茶皂素對(duì)生活于淺海水域中不同水層的6種魚類，其中包括底層或穴居的鰕虎魚類，中層的鱸魚、梭魚魚類和上層的三刺魨、頜針魚的毒性試驗(yàn)，可以確認(rèn)，兩種型號(hào)茶皂素特別是茶皂素Ⅰ，用于對(duì)蝦養(yǎng)殖中有害魚類的清除是一種理想的藥物，且優(yōu)于農(nóng)藥魚藤酮，它不僅魚毒活性大，而且蝦池使用的安全性大。 椐茂野對(duì)紋縞鰕虎魚和對(duì)蝦的研究結(jié)果，在充氣條件下，含有5.0%魚藤酮的魚藤粉，對(duì)魚的致死濃度為0.5ppm，與茶皂素Ⅰ相同，但濃度在5ppm時(shí)，對(duì)蝦僅活14小時(shí)，10ppm時(shí)只活8小時(shí)，而茶皂素Ⅰ的使用安全，在不鼓氣情況下，大于10ppm，鼓氣時(shí)高至80ppm，經(jīng)96小時(shí)也很少死亡。并且，應(yīng)用于生產(chǎn)上，大面積使用時(shí)，藥劑往往很難以均相而造成局部濃度過(guò)高的現(xiàn)象，魚藤酮就有一定的危險(xiǎn)性，因而不宜在養(yǎng)殖池中使用。況且我國(guó)的魚藤酮來(lái)源于進(jìn)口，價(jià)格昂貴，貨源又不穩(wěn)定，而茶皂素在我國(guó)有豐富的資源，目前已有相當(dāng)規(guī)模的生產(chǎn)能力，貨源可靠，這是魚藤酮無(wú)法與它比較的。 有關(guān)茶皂素對(duì)魚類的毒性機(jī)理問(wèn)題，從試驗(yàn)初步結(jié)果來(lái)看，引起魚類中毒主要在于破壞血液，造成溶血所致，但屬何種溶血類型，是滲透性溶血、化學(xué)性溶血或生物性溶血尚不清楚。 茶皂素對(duì)對(duì)蝦與魚類的毒性大小不一，是否與他們的血液結(jié)構(gòu)不同有關(guān)？是血球膜的不同，還是攜帶氧氣的載體不同？業(yè)已清楚，魚的血液中攜帶氧氣的是血紅素，而蝦的血液傳遞氧氣的是血蘭素。血紅素的核心是Fe+ +，而血蘭素的核心是Cu+ +，前者的血液為紅色，后者的血液是無(wú)色的。雖然兩者均以鰓呼吸，方式相同，但藥劑對(duì)它的作用是不同的。所以，關(guān)于茶皂素對(duì)魚的毒性機(jī)理值得進(jìn)一步研究。 通過(guò)茶皂素對(duì)魚類及對(duì)蝦的毒性試驗(yàn)認(rèn)為，茶皂素是一種性能良好的清池劑，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)蝦養(yǎng)殖———————“魚死而蝦不死”。 結(jié) 論 1.兩種型號(hào)的茶皂素均具有明顯的魚毒活性作用，茶皂素Ⅰ則更強(qiáng)。茶皂素Ⅰ對(duì)鱸魚、紋縞鰕虎魚、三刺魨及頜針魚的全致死濃度為0.5ppm，LD50為0.3—0.4ppm；對(duì)梭魚和鈍尖尾鰕虎魚全致死濃度在0.6—0.7ppm，LD50約0.4ppm；茶皂素Ⅱ?qū)y縞鰕虎魚的全致死濃度為1ppm，而1ppm的茶皂素Ⅱ?qū)|魚致死量為90%。兩種茶皂素的毒魚速度快，中毒死亡在16小時(shí)內(nèi)可見(jiàn)效。 2.茶皂素類對(duì)魚類、對(duì)蝦及餌料生物——沙蠶的毒性差異較大，以其作為清池劑或者對(duì)蝦養(yǎng)殖中的有害魚類的清除，是一種非常理想的藥物。為確保有害魚類的清除而不影響對(duì)蝦及沙蠶的生存，兩種茶皂素的應(yīng)用濃度在1—2ppm為宜。 |
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